GB/T 33410-2016 生化試劑中蛋白酶K活性檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容是什么？檢測(cè)報(bào)告如何辦理呢？百檢為您提供一站式的檢測(cè)服務(wù)。

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GB/T 33410-2016.

1范圍

GB/T 33410規(guī)定了生化試劑中蛋白酶K活性檢測(cè)方法。

GB/T 33410適用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用的蛋白酶K活性的測(cè)定。

規(guī)范性引用文件

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GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

蛋白酶K活性單位protease K activity unit

在55℃,pH 8.0時(shí),1 min內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生1 ug L-酪氨酸為一個(gè)酶活性單位。注:活性單位為U/mg.U/g或U/mL。

4原理

蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,可催化含有較多的絲氨酸位點(diǎn)的α-酪蛋白水解。本方法中采用a酪蛋白為反應(yīng)底物,經(jīng)蛋白酶K催化水解為L(zhǎng)-酪氨酸,在275 nm處測(cè)定吸光度值。再通過(guò)測(cè)量各個(gè)濃度的L-酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在275 nm 處的吸光度值,并構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線得出線性回歸方程，以外標(biāo)法定量。計(jì)算蛋白酶K的酶活性。

5儀器設(shè)備及器具

5.1 恒溫水浴鍋:控溫精度士0.2 ℃.

5.2 pH計(jì):*至0.01 pH.

5.3 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì):吸光度值*至0.001.

5.4 1 cm石英比色皿。

5.5電子天平:感量0.000 1 g.

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檢測(cè)流程步驟

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