GB/T 39729-2020.General requirements for measurement of cell purity- Flow cytometry.
1范圍
GB/T 39729描述了流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞純度的術(shù)語(yǔ)、定義和縮略語(yǔ).方法原理,以及包括試劑或材料.儀器設(shè)備、樣本制備、試驗(yàn)步驟.數(shù)據(jù)分析、方法確認(rèn)和報(bào)告的通用要求。
GB/T 39729適用于研究.生產(chǎn)與檢驗(yàn)中通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行的細(xì)胞純度的測(cè)定。
2規(guī)范性引用文件
本文件沒(méi)有規(guī)范性引用文件。
3術(shù)語(yǔ).定義和縮略語(yǔ)
3.1術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
3.1.1
目標(biāo)細(xì)胞 cell of testing target
與檢測(cè)目標(biāo)相一致,具有流式細(xì)胞儀可檢測(cè)特征(如大小、數(shù)量.特定標(biāo)志物)的細(xì)胞。
3.1.2
細(xì)胞純度 cell purity
目標(biāo)細(xì)胞占樣本總細(xì)胞數(shù)量的百分率。
3.1.3
細(xì)胞染色 cell staining
細(xì)胞特定成分與熒光染料或標(biāo)記了熒光染料的特異性抗體結(jié)合后進(jìn)行檢測(cè)的一種技術(shù)。
注:特定成分為蛋白質(zhì).DNA.RNA等.
3.2縮略語(yǔ)
下列縮略語(yǔ)適用于本文件。
FSC:前向角散射光( Forward Scatter)
SSC:側(cè)向角散射光(Side Scatter)
4方法原理
使用流式細(xì)胞儀,通過(guò)總細(xì)胞和目標(biāo)細(xì)胞不同的光學(xué)(散射光和熒光)特性,對(duì)待測(cè)樣本中的總細(xì)胞和目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分和計(jì)數(shù)。根據(jù)總細(xì)胞和目標(biāo)細(xì)胞的測(cè)量數(shù)量,計(jì)算得到目標(biāo)細(xì)胞純度。
5通用要求
5.1試劑或材料
5.1.1熒光染料
選擇的熒光染料應(yīng)能被試驗(yàn)所用流式細(xì)胞儀的激光器激發(fā),其激發(fā)光信號(hào)能被流式細(xì)胞儀的檢測(cè)器接收。
5.1.2熒 光染料標(biāo)記的抗體
確保選擇的熒光染料標(biāo)記的抗體對(duì)目標(biāo)細(xì)胞具有特異性。
5.1.3鞘液
鞘液應(yīng)為無(wú)熒 光本底的平衡電解質(zhì)溶液，其潔凈度、吸光度、pH值、滲透壓應(yīng)滿足流式細(xì)胞儀的要求。

檢測(cè)流程步驟

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