流式細(xì)胞儀使用標(biāo)記有不同可見光化學(xué)物質(zhì)的單克隆抗體與被測(cè)成分相互作用,然后使用血細(xì)胞分析儀檢測(cè)被測(cè)組織細(xì)胞。被測(cè)組織細(xì)胞隨流室中流動(dòng)的鞘液排列成一條直線,一個(gè)個(gè)快速通過激光聚焦區(qū)。當(dāng)激光照射每個(gè)組織細(xì)胞時(shí)可以同時(shí)獲得兩種散射光,即前向角散射和側(cè)向角散射,以及激發(fā)可見光標(biāo)記發(fā)出的信號(hào)。通過使用這些信號(hào),可以計(jì)算相對(duì)含量并獲得組織細(xì)胞群的相對(duì)比率。細(xì)胞周期分為間期和有絲分裂。
間期可分為三個(gè)階段:DNA合成前期(G1)、DNA合成后期(S)和DNA合成后期(G2)。一些組織細(xì)胞在分裂后暫時(shí)離開細(xì)胞周期,停止細(xì)胞分裂,執(zhí)行一些生物功能(G0期)。二倍體組織細(xì)胞的DNA含量處于G1/G0期,四倍體組織細(xì)胞處于G2/M期,S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。PI能與DNA結(jié)合,其可見光強(qiáng)度直接反映組織和細(xì)胞中DNA的含量。
因此,用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行PI染色檢測(cè)組織細(xì)胞中的DNA含量時(shí),細(xì)胞周期可分為G1/G0期、S期和G2/M期。
試驗(yàn)項(xiàng)目:
細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞處理、細(xì)胞收集、添加試劑、進(jìn)行檢測(cè)依據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
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檢測(cè)流程步驟
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